Daftar Isi:
Video: Bagaimana Anda memuat sampel dalam kromatografi kolom?
2024 Pengarang: Miles Stephen | [email protected]. Terakhir diubah: 2023-12-15 23:37
Untuk memuat kolom:
- larutkan Sampel dalam jumlah minimum pelarut (5-10 tetes).
- Menggunakan pipet atau jarum suntik dengan jarum tebal, teteskan Sampel langsung ke atas silika.
- Setelah seluruh Sampel telah ditambahkan, izinkan kolom untuk mengalirkan sehingga tingkat pelarut menyentuh bagian atas silika.
Mengenai ini, berapa banyak silika yang Anda gunakan dalam satu kolom?
Kisaran yang baik adalah 100/20 hingga 100/10 (5 hingga 10 mL) elutan untuk 100g silika . Ini bukan ide yang baik untuk menggunakan pelarut yang berbeda di sini - pemisahan akan sangat terganggu.
Kedua, bagaimana cara kerja kromatografi kolom flash? Kromatografi Flash . Lapisan tipis kromatografi digunakan untuk memantau reaksi, memeriksa kemurnian senyawa dan mengoptimalkan campuran pelarut untuk kromatografi kolom . Ini adalah teknik mikro yang membutuhkan jumlah senyawa yang sangat kecil.
Di sini, mengapa penting untuk tidak membiarkan fase diam mengering saat menjalankan kolom?
Dengan kata lain, bubur di dalam kolom seharusnya tidak pernah diizinkan untuk mengering . Jika ini terjadi, itu dapat membuat retakan dan ketidakrataan pada padatan fase , yang akan menurunkan efisiensi pemisahan. Sampel yang akan dipisahkan dimasukkan ke dalam larutan dalam pelarut yang sesuai, lebih disukai sekonsentrasi mungkin.
Apa yang terjadi jika kolom mengering?
Jika kamu membiarkan kolom menjadi kering silika akan mulai retak dan Anda akan mendapatkan pemisahan yang buruk dari senyawa Anda. Seperti kamu Lari NS kolom , jangan biarkan tingkat pelarut turun di bawah tingkat silika gel atau Anda akan mendapatkan hasil yang buruk.
Direkomendasikan:
Bagaimana Anda memuat elektroforesis gel?
Memuat Sampel dan Menjalankan Gel Agarose: Tambahkan buffer pemuatan ke setiap sampel DNA Anda. Setelah memadat, masukkan gel agarosa ke dalam kotak gel (unit elektroforesis). Isi kotak gel dengan 1xTAE (atau TBE) sampai gel tertutup. Hati-hati memuat tangga berat molekul ke jalur pertama gel
Ketika volume sampel gas diperkecil, tekanan sampel gas?
Penurunan Tekanan Hukum gabungan gas menyatakan bahwa tekanan gas berbanding terbalik dengan volume dan berbanding lurus dengan suhu. Jika suhu dipertahankan konstan, persamaan direduksi menjadi hukum Boyle. Oleh karena itu, jika Anda mengurangi tekanan sejumlah gas tertentu, volumenya akan meningkat
Bagaimana Anda mengemas kolom untuk kromatografi kolom?
Mengemas kolom (silika gel): Gunakan seutas kawat untuk menambahkan sumbat kapas ke bagian bawah kolom. Jepit kolom ke dudukan cincin dan tambahkan pasir secukupnya untuk mengisi bagian kolom yang melengkung. Tempatkan penjepit penjepit pada tabung, kemudian isi kolom 1/4 sampai 1/3 penuh dengan eluen awal
Senyawa manakah yang terelusi lebih dulu dalam kromatografi kolom?
Pelarut yang kurang polar pertama kali digunakan untuk mengelusi senyawa yang kurang polar. Setelah senyawa yang kurang polar keluar dari kolom, pelarut yang lebih polar ditambahkan ke kolom untuk mengelusi senyawa yang lebih polar
Bagaimana silika gel disiapkan untuk kromatografi kolom?
Persiapan Kolom: Siapkan bubur silika gel dengan pelarut yang sesuai & tuangkan perlahan ke dalam kolom. Buka stop cock & biarkan beberapa pelarut mengalir keluar. Lapisan pelarut harus selalu menutupi adsorben; jika tidak, retakan akan berkembang di kolom