Daftar Isi:

Bagaimana Anda menemukan konsentrasi DNA dari absorbansi?
Bagaimana Anda menemukan konsentrasi DNA dari absorbansi?

Video: Bagaimana Anda menemukan konsentrasi DNA dari absorbansi?

Video: Bagaimana Anda menemukan konsentrasi DNA dari absorbansi?
Video: Konsep Spektrofotometer Uv-Vis 2024, Desember
Anonim

konsentrasi DNA diperkirakan dengan mengukur daya serap pada 260nm, menyesuaikan A260 pengukuran kekeruhan (diukur dengan daya serap pada 320nm), dikalikan dengan faktor pengenceran, dan menggunakan hubungan bahwa A260 1,0 = 50µg/ml dsDNA murni.

Demikian juga, orang bertanya, bagaimana Anda menemukan konsentrasi DNA?

Untuk menentukan konsentrasi DNA dalam sampel asli, lakukan perhitungan berikut:

  1. konsentrasi dsDNA = 50 g/mL × OD260 × faktor pengenceran.
  2. Konsentrasi dsDNA = 50 g/mL × 0,65 × 50.
  3. konsentrasi dsDNA = 1,63 mg/mL.

Juga, berapa konsentrasi DNA yang baik? A bagus kualitas DNA sampel harus memiliki A260/A280 rasio 1,7-2,0 dan A260/A230 rasio lebih besar dari 1,5, tetapi karena sensitivitas teknik yang berbeda untuk kontaminan ini bervariasi, nilai-nilai ini hanya boleh diambil sebagai panduan kemurnian sampel Anda.

Dengan cara ini, apakah DNA menyerap pada 280 nm?

Rasio absorbansi pada 260 nm vs 280 nm adalah biasa digunakan untuk menilai DNA kontaminasi larutan protein, karena protein (khususnya, asam amino aromatik) menyerap ringan di 280 nm.

Bagaimana Anda menggunakan NanoDrop untuk konsentrasi DNA?

Pada dasarnya nanodrop memberi Anda pilihan untuk memilih DNA , RNA, Protein. Anda harus memilih DNA , lalu tempatkan 2 L air (mili Q preferent) pilih "Kosong" setelah itu tempatkan 2 L air lagi untuk memastikan bahwa ukurannya adalah 0. Kemudian tempatkan 2 L sampel Anda. Anda akan mendapatkan pengukuran.

Direkomendasikan: