Mengapa spektrofotometer harus diatur pada panjang gelombang tertentu?

2024 Pengarang: Miles Stephen | [email protected]. Terakhir diubah: 2023-12-15 23:37

Saat Anda menyesuaikan panjang gelombang pada suatu spektrofotometer , Anda adalah mengubah posisi prisma atau kisi difraksi sehingga berbeda panjang gelombang cahaya adalah diarahkan ke celah. Semakin kecil lebar celah, semakin baik kemampuan instrumen untuk menyelesaikan berbagai senyawa.

Darinya, pada panjang gelombang berapa spektrofotometer akan diatur?

Tergantung pada rentang panjang gelombang sumber cahaya, dapat diklasifikasikan menjadi dua jenis yang berbeda: Spektrofotometer UV-tampak: menggunakan cahaya pada rentang ultraviolet (185 - 400 nm) dan rentang tampak (400 - 700 nm ) spektrum radiasi elektromagnetik.

Demikian juga, mengapa Anda perlu mengkalibrasi spektrometer setiap kali Anda mengubah panjang gelombang? Spektrofotometer perlu dikalibrasi terhadap solusi kosong jadi itu pengukuran setelah itu dapat menggunakan absorbansi larutan blanko sebagai referensi nol. Ukuran kapasitas suatu zat untuk menyerap cahaya tertentu panjang gelombang.

pada panjang gelombang berapakah pembacaan harus dilakukan?

Mengambil bacaan pada interval 5 nm sedikit sebelum dan sesudah ini panjang gelombang . Misalnya, jika absorbansi maksimum ditemukan pada 450 nm, maka untuk mendapatkan yang lebih akurat membaca dari maks, ambil absorbansi bacaan pada 440, 445, 455 dan 460 nm.

Mengapa Anda mengukur absorbansi larutan pada 550 nm?

Protein bereaksi dengan ion tembaga dalam basa larutan untuk membentuk kompleks berwarna ungu yang menyerap cahaya pada 550 nm . Oleh karena itu, oleh ukur konsentrasi kompleks, menggunakan A550 ( Daya serap pada 550 nm ), Anda juga merupakan ukur konsentrasi proteinnya.