Berapa biaya untuk mengubah ligasi?
Berapa biaya untuk mengubah ligasi?

Video: Berapa biaya untuk mengubah ligasi?

Video: Berapa biaya untuk mengubah ligasi?
Video: METODE OPERASI AMBEIEN ATAU WASIR TERBARU + KISARAN BIAYA 2022 #wasir #operasiambeien #metode 2024, November
Anonim

Transformasi . Tambahkan antara 1-5 l of ligasi campuran ke sel yang kompeten untuk transformasi . Diperpanjang ligasi dengan PEG menyebabkan penurunan di transformasi efisiensi (Cepat Ligasi Paket). Elektroporasi direkomendasikan untuk konstruksi besar (>10.000 bp).

Di sini, berapa banyak produk ligasi yang saya butuhkan untuk transformasi?

Transformasi . Tambahkan antara 1-5 l of ligasi campuran ke sel yang kompeten untuk transformasi . Diperpanjang ligasi dengan PEG menyebabkan penurunan di transformasi efisiensi (Cepat Ligasi Paket). Elektroporasi direkomendasikan untuk konstruksi besar (>10.000 bp).

Selanjutnya, pertanyaannya adalah, apa itu Ligasi dan Transformasi? Dalam eksperimen kloning yang khas, para peneliti pertama-tama memasukkan sepotong DNA, seperti gen, ke dalam potongan DNA melingkar yang disebut plasmid. Langkah ini menggunakan enzim restriksi dan DNA ligase dan disebut a ligasi . Setelah ligasi , langkah selanjutnya adalah mentransfer DNA ke bakteri dalam proses yang disebut transformasi.

Selanjutnya, orang mungkin juga bertanya, berapa banyak DNA yang dibutuhkan untuk ligasi?

Konsentrasi keseluruhan vektor + sisipan harus antara 1-10 g/ml untuk efisiensi ligasi . Vektor: Sisipkan rasio molar antara 1:1 dan 1:10 direkomendasikan (1:3 adalah tipikal). Jika Anda tidak yakin dengan DNA konsentrasi, melakukan beberapa ligasi dengan rasio yang bervariasi.

Berapa lama Anda dapat menyimpan reaksi ligasi?

Ligasi bisa dilakukan pada suhu kamar atau lebih dingin (pikirkan 12-16°C) semalaman atau bahkan selama beberapa hari, jika kamu benar-benar sibuk. Kamu bisa juga menyimpan ligasi di lemari es dan keluarkan nanti untuk melanjutkan pengikatan pada suhu kamar selama panjang seperlunya.

Direkomendasikan: