Apakah ada metode lain untuk memurnikan produk PCR?
Apakah ada metode lain untuk memurnikan produk PCR?

Video: Apakah ada metode lain untuk memurnikan produk PCR?

Video: Apakah ada metode lain untuk memurnikan produk PCR?
Video: Metode PCR (Polymerase Chain Reaction) 2024, November
Anonim

Untuk aplikasi yang membutuhkan PCR pembersihan atau validasi dari PCR hasil, di sana dua metode umumnya diikuti: produk PCR isolasi menggunakan kolom, dan gel pemurnian dari gel agarosa.

Di sini, jenis kromatografi apa yang digunakan untuk memurnikan produk PCR?

Untuk memurnikan produk PCR, digunakan kromatografi eksklusi ukuran. Ini menjebak molekul kecil seperti protein, primer , dan nukleotida sementara molekul besar seperti produk PCR terlalu besar untuk memasuki manik-manik dan melewati kolom ke dalam tabung pengumpul.

Juga, bagaimana Anda memurnikan DNA? Pada dasarnya, Anda bisa memurnikan milikmu DNA sampel dengan melisiskan sampel sel dan/atau jaringan Anda menggunakan prosedur yang paling tepat (gangguan mekanis, perlakuan kimia, atau pencernaan enzimatik), mengisolasi asam nukleat dari kontaminannya dan mengendapkannya dalam larutan buffer yang sesuai.

Selain itu, mengapa kami memurnikan produk PCR?

Pemurnian DNA dari PCR reaksi biasanya diperlukan untuk penggunaan hilir, dan memfasilitasi penghapusan enzim, nukleotida, primer dan komponen buffer. Metode yang umum digunakan menggunakan kolom spin yang mengandung matriks silika yang DNA dapat secara selektif terikat dengan adanya garam chaotropic.

Mengapa DNA harus dibersihkan?

Kita membersihkan ke atas DNA dari larutan berair untuk menghilangkan garam penyangga, enzim atau zat lain yang dapat mempengaruhi aplikasi hilir. Contohnya termasuk reaksi PCR membersihkan ke atas, membersihkan up setelah pembatasan mencerna dan membersihkan dari genomik atau plasmid DNA terkontaminasi protein/debris seluler.

Direkomendasikan: